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技術文章

實驗室培養基制備要求

2021-02-10 11:03:07

  培養(yang)(yang)基制備的(de)質量(liang)將直接影響微生(sheng)物(wu)生(sheng)長(chang)。因(yin)為(wei)各種微生(sheng)物(wu)對其營養(yang)(yang)要求不完全(quan)相同,培養(yang)(yang)目的(de)的(de)不同,各種培養(yang)(yang)基制備要求如(ru)下(xia):

  1.根據(ju)培(pei)養基配(pei)方的(de)成分按量(liang)(liang)稱取,然后溶(rong)于蒸餾水中,在(zai)使用前對(dui)應用的(de)試劑藥品應進行(xing)質量(liang)(liang)檢驗(yan)。

  2.PH測(ce)定(ding)(ding)及調節(jie):PH測(ce)定(ding)(ding)要在(zai)培(pei)養(yang)基(ji)冷至室溫時(shi)進行(xing),因在(zai)熱或(huo)(huo)(huo)冷的(de)情況下,其PH有一(yi)定(ding)(ding)差異,當測(ce)定(ding)(ding)好時(shi),按計算量(liang)加入堿或(huo)(huo)(huo)酸混勻后(hou),應再(zai)測(ce)試一(yi)次。培(pei)養(yang)基(ji)PH值一(yi)定(ding)(ding)要準(zhun)確(que),否則會影(ying)響(xiang)微生物(wu)的(de)生長或(huo)(huo)(huo)影(ying)響(xiang)結果的(de)觀察。但需注意因高壓(ya)滅(mie)菌可影(ying)響(xiang)一(yi)些(xie)培(pei)養(yang)基(ji)的(de)PH降低或(huo)(huo)(huo)升高,故不宜滅(mie)菌壓(ya)力過(guo)高或(huo)(huo)(huo)次數太(tai)多,以免(mian)影(ying)響(xiang)培(pei)養(yang)基(ji)的(de)質量(liang),指示劑、去(qu)氧膽酸鈉(na)、瓊脂(zhi)等一(yi)般在(zai)調完PH后(hou)再(zai)加入。

  3.培(pei)養(yang)基(ji)(ji)需保持(chi)澄清,便于觀察細(xi)菌(jun)的生長情況(kuang),培(pei)養(yang)基(ji)(ji)加(jia)熱煮沸后,可(ke)用脫脂棉花或絨布過濾,以除去沉(chen)淀物,必(bi)要時(shi)可(ke)用雞蛋白澄清處理,所(suo)用瓊脂條(tiao)要預先(xian)洗凈晾(liang)干后使用,避免(mian)因瓊脂含(han)雜質而影(ying)響透明度。

  4.盛裝培養基不宜(yi)用鐵、銅等容器(qi),使用洗凈(jing)的中性硬質玻璃容器(qi)為(wei)好。

  5.培(pei)(pei)養基(ji)(ji)的(de)滅(mie)菌(jun)(jun)既要(yao)達到完全滅(mie)菌(jun)(jun)目的(de),又要(yao)注意不因加(jia)熱而降低其營養價值,一般(ban)121℃15min即可,如(ru)為含有不耐高熱物質的(de)培(pei)(pei)養基(ji)(ji)如(ru)糖類、血清、明膠等,則應采用(yong)低溫滅(mie)菌(jun)(jun)或間歇(xie)法(fa)滅(mie)菌(jun)(jun),一些不能加(jia)熱的(de)試(shi)劑(ji)如(ru)亞碲酸鉀(jia)、卵黃、TTC、抗(kang)菌(jun)(jun)素等,待(dai)基(ji)(ji)礎瓊脂高壓滅(mie)菌(jun)(jun)后涼至50℃左(zuo)右再加(jia)入。

  6.每(mei)批(pi)培養(yang)(yang)(yang)基(ji)制(zhi)備(bei)好(hao)后,應做無菌(jun)生長試(shi)驗(yan)及所檢菌(jun)株生長試(shi)驗(yan)。如(ru)果(guo)是(shi)生化培養(yang)(yang)(yang)基(ji),使用標準菌(jun)株接種培養(yang)(yang)(yang),觀察(cha)生化反(fan)應結果(guo),應呈正(zheng)常反(fan)應,培養(yang)(yang)(yang)基(ji)不應貯(zhu)存過久,必(bi)要時可置4℃冰箱存放。

  7.目前(qian)各種(zhong)干燥培(pei)養基較多,每批需用(yong)標準菌株進(jin)行生(sheng)長(chang)試驗或生(sheng)化反應(ying)觀察(cha),各種(zhong)培(pei)養基用(yong)相應(ying)菌株生(sheng)長(chang)試驗良好后(hou)方(fang)可應(ying)用(yong),新購進(jin)的或存(cun)放過久的干燥培(pei)養基,在配制時(shi)也(ye)應(ying)測(ce)PH,使用(yong)時(shi)需根據產品說明書用(yong)量(liang)和方(fang)法進(jin)行。

  8.每批(pi)制(zhi)備的(de)培養(yang)基所用化學試(shi)劑(ji)、滅菌情(qing)況及菌株生長試(shi)驗結果(guo)、制(zhi)作人員等(deng)應(ying)做好記錄(lu),以備查詢。