組織培養前實驗室設計
在進行植物組(zu)織(zhi)培(pei)養工作(zuo)(zuo)之前,首先應對工作(zuo)(zuo)中需(xu)要(yao)哪(na)些最(zui)基本的(de)設(she)備條(tiao)件(jian)有個全(quan)面的(de)了解,以便因地(di)制(zhi)宜地(di)利(li)用(yong)現有房屋(wu),或(huo)新(xin)建(jian)、改建(jian)實(shi)驗(yan)室(shi)。實(shi)驗(yan)室(shi)的(de)大小(xiao)取(qu)決于工作(zuo)(zuo)的(de)目(mu)的(de)和規(gui)(gui)模。以工廠(chang)化生(sheng)產為目(mu)的(de),實(shi)驗(yan)室(shi)規(gui)(gui)模太小(xiao),則(ze)會限(xian)制(zhi)生(sheng)產,影響效(xiao)率。在設(she)計(ji)組(zu)織(zhi)培(pei)養實(shi)驗(yan)室(shi)時,應按(an)組(zu)織(zhi)培(pei)養程序來沒計(ji),避免某些環節倒排,引(yin)起日(ri)后工作(zuo)(zuo)混(hun)亂。植物組(zu)織(zhi)培(pei)養是(shi)在嚴格無菌(jun)的(de)條(tiao)件(jian)下(xia)進行的(de)。要(yao)做到無菌(jun)的(de)條(tiao)件(jian),需(xu)要(yao)一(yi)定(ding)的(de)設(she)備、器(qi)材和用(yong)具,同時還需(xu)要(yao)人(ren)工控制(zhi)溫度(du)、光照、濕度(du)等培(pei)養條(tiao)件(jian)。
實驗室設計原則:保證無菌操作,達(da)到工作方(fang)便,防止污染。
實驗室(shi)(shi)組成:化學實驗室(shi)(shi)、洗滌菌(jun)室(shi)(shi)、無菌(jun)操作室(shi)(shi)(接種室(shi)(shi))、培養室(shi)(shi)、細胞學實驗室(shi)(shi)、其他小(xiao)型儀(yi)器設備(bei)。
1) 化(hua)學實驗室(shi)(準(zhun)備室(shi)):完成所使用的各(ge)種(zhong)藥品的貯(zhu)備、稱量、溶解、配制、培養基分裝(zhuang)等。
主要設備(bei):藥(yao)品柜、防(fang)塵櫥(放置培養容器)、冰箱、天平、蒸餾(liu)水器、酸度計及(ji)常用(yong)的培養基配制用(yong)玻璃儀器.
2) 洗滌、滅菌室(shi):完成各種器具的洗滌、干(gan)燥、保存、培養(yang)基的滅菌等。
主(zhu)要(yao)設備:水池(chi)、操(cao)作臺(tai)、高壓滅(mie)菌鍋、干燥(zao)滅(mie)菌器(如(ru)烘箱)等。
3) 無菌操作(zuo)室(接(jie)(jie)種室):主要(yao)用于植物(wu)材料(liao)的(de)消毒、接(jie)(jie)種、培養物(wu)的(de)轉移、試管苗的(de)繼代、原(yuan)生質(zhi)體的(de)制備以及(ji)一切需要(yao)進行無菌操作(zuo)的(de)技術程序。
主要設備:紫(zi)外(wai)光源、超凈工(gong)作臺(tai)、消毒(du)器(qi)、酒精燈(deng)、接(jie)(jie)種(zhong)器(qi)械(接(jie)(jie)種(zhong)鑷子、剪(jian)刀、解剖刀、接(jie)(jie)種(zhong)針)等。
接(jie)(jie)種室(shi)宜(yi)小不宜(yi)大,一般7~8平米,要求(qiu)地(di)面、天花板及四壁盡可能密閉光滑,易于清(qing)潔和消(xiao)毒。配置拉(la)動門,以減(jian)少開關門時的空(kong)氣擾(rao)動。接(jie)(jie)種室(shi)要求(qiu)干(gan)爽安靜,清(qing)潔明亮。在適當位置吊裝(zhuang)1~2盞(zhan)紫外線滅(mie)菌(jun)燈,用以照(zhao)射(she)滅(mie)菌(jun)。最好安裝(zhuang)一小型空(kong)調,使室(shi)溫可控,這(zhe)樣可使門窗緊閉,減(jian)少與外界空(kong)氣對流。接(jie)(jie)種室(shi)應設有緩(huan)沖問,面積1m2為(wei)宜(yi)。進入無(wu)菌(jun)操作室(shi)前在此更衣換鞋,以減(jian)少進出時帶(dai)入接(jie)(jie)種室(shi)雜菌(jun)。緩(huan)沖間最好也(ye)安一盞(zhan)紫外線滅(mie)菌(jun)燈,用以照(zhao)射(she)滅(mie)菌(jun)。
4) 培養(yang)室:培養(yang)室是將接種的(de)材料進(jin)行(xing)培養(yang)生(sheng)長的(de)場所。培養(yang)室的(de)大小可根據需要(yao)培養(yang)架的(de)大小、數目、及其他附屬設(she)(she)備(bei)而定。其設(she)(she)計以(yi)充分(fen)利(li)用空間和節省能(neng)源為原則。高度比培養(yang)架略高為宜,周圍墻(qiang)壁要(yao)求(qiu)有絕熱防火的(de)性能(neng)。
培(pei)養(yang)材料放(fang)在(zai)培(pei)養(yang)架(jia)上(shang)培(pei)養(yang)。培(pei)養(yang)架(jia)大多由(you)金屬制成,一般(ban)設5層(ceng),最(zui)低一層(ceng)離地高(gao)約lOcm,其(qi)他每層(ceng)間(jian)隔30cm左右(you),培(pei)養(yang)架(jia)即高(gao)1.7m左右(you)。培(pei)養(yang)架(jia)長(chang)度(du)都是(shi)根據日光(guang)燈的(de)長(chang)度(du)而(er)設計(ji),如采(cai)用40W日光(guang)燈,則長(chang)1.3m,30W的(de)長(chang)lm,寬度(du)一般(ban)為60cm。
培養(yang)室最(zui)重要的因子是(shi)溫度,一般(ban)保持(chi)在20—27℃左右(you),具(ju)備產熱(re)(re)裝置(zhi),并安裝窗(chuang)式或立式空調機。由于熱(re)(re)帶植(zhi)物(wu)和寒(han)帶植(zhi)物(wu)等(deng)不同(tong)種類要求不同(tong)溫度,最(zui)好不同(tong)種類有不同(tong)的培養(yang)室。
室內濕(shi)度也(ye)要(yao)求恒定(ding),相對濕(shi)度以保持(chi)在70%~80%為好,可(ke)安裝(zhuang)加濕(shi)器(qi)。控(kong)制光(guang)照(zhao)時(shi)間可(ke)安裝(zhuang)定(ding)時(shi)開關鐘,一般需要(yao)每天光(guang)照(zhao)10-16h,也(ye)有的需要(yao)連(lian)續照(zhao)明。短日(ri)(ri)照(zhao)植(zhi)物需要(yao)短日(ri)(ri)照(zhao)條件(jian),長(chang)日(ri)(ri)照(zhao)植(zhi)物需要(yao)長(chang)日(ri)(ri)照(zhao)條件(jian)。現代組培實驗室大多設(she)計為采用天然太陽(yang)光(guang)照(zhao)作為主(zhu)要(yao)能源,這樣(yang)不但可(ke)以節省能源,而且組培苗接(jie)受太陽(yang)光(guang)生長(chang)良(liang)好,馴化(hua)易成(cheng)活。在陰雨天可(ke)用燈光(guang)作補充。
主要設備:培養架(jia)(控溫控光控濕)、搖床、培養箱、紫外光源等(deng)。
5) 細胞學實驗(yan)室:用(yong)于對培養(yang)物(wu)的(de)觀(guan)察分析(xi)與培養(yang)物(wu)的(de)計數等(deng)。主要設備:雙(shuang)筒(tong)實體顯(xian)微(wei)鏡(jing)、顯(xian)微(wei)鏡(jing)、倒置(zhi)顯(xian)微(wei)鏡(jing)等(deng)。
6) 其他小型儀器(qi)設備(bei):分注(zhu)器(qi)、血球計數器(qi)、移液(ye)槍、過濾滅菌器(qi)、電爐等(deng)加熱器(qi)具(ju)、磁(ci)力攪拌器(qi)、低速臺(tai)式離心(xin)機等(deng)。