無菌室的建造規程
1. 無菌室應(ying)設有無菌操作間和緩沖間,無菌操作間潔(jie)凈(jing)度應(ying)達到(dao)10000級,室內溫度保(bao)持在(zai)20-24℃,濕度保(bao)持在(zai)45-60%。超凈(jing)臺潔(jie)凈(jing)度應(ying)達到(dao)100級。
2. 無菌(jun)室應保持清潔(jie),嚴禁(jin)堆放(fang)雜(za)物,以(yi)防污(wu)染。
3. 嚴防一(yi)切滅菌器材和培養基(ji)污染(ran),已污染(ran)者應停止使用。
4. 無菌室應備有工作(zuo)濃度(du)的(de)消毒液(ye),如5%的(de)甲(jia)酚溶液(ye),70%的(de)酒精(jing),0.1%的(de)新潔爾滅(mie)溶液(ye),等(deng)等(deng)。
5. 無(wu)菌室應定期用適宜(yi)的消毒液滅菌清(qing)潔,以保(bao)證無(wu)菌室的潔凈度符合要(yao)求(qiu)。
6. 需要帶入無菌室(shi)使用的儀器,器械,平皿等一切物(wu)品(pin),均應包扎(zha)嚴密,并應經過(guo)適宜的方法滅菌。
7. 工(gong)作人員(yuan)進入無(wu)菌(jun)室(shi)前,必須(xu)用(yong)(yong)(yong)肥(fei)皂或消毒液(ye)洗手(shou)消毒,然后在緩沖間更換(huan)專用(yong)(yong)(yong)工(gong)作服,鞋,帽子,口(kou)罩和手(shou)套(或用(yong)(yong)(yong)70%的(de)乙醇再次擦拭雙手(shou)),方(fang)可進入無(wu)菌(jun)室(shi)進行操作。
8. 無(wu)菌(jun)室(shi)使用前必(bi)須打開無(wu)菌(jun)室(shi)的紫(zi)外(wai)燈輻照滅(mie)菌(jun)30分鐘以上,并且同時打開超凈臺進行(xing)吹風(feng)。操作完畢,應及(ji)時清理(li)無(wu)菌(jun)室(shi),再(zai)用紫(zi)外(wai)燈輻照滅(mie)菌(jun)20分鐘。
9. 供試品(pin)在(zai)檢查前,應保持(chi)外包裝完整,不得開啟,以防(fang)污染。檢查前,用70%的(de)酒精棉(mian)球消毒外表面(mian)。
10. 每(mei)次操作過(guo)程中,均(jun)應做陰性對(dui)照(zhao),以檢(jian)查無菌操作的可(ke)靠性。
11. 吸取(qu)菌液時,必(bi)須用吸耳球吸取(qu),切勿直接用口接觸吸管(guan)。
12. 接(jie)種針每次使用前后,必須(xu)通過火焰灼燒滅菌,待冷卻后,方可接(jie)種培養(yang)物。
13. 帶有菌液的(de)吸管,試管,培養皿(min)等(deng)器皿(min)應浸泡(pao)在盛有5%來(lai)蘇爾(er)溶液的(de)消毒桶內(nei)消毒,24小時后取(qu)出沖(chong)洗。
14. 如(ru)有菌(jun)(jun)液灑在(zai)桌上或(huo)地上,應立(li)即用5%石碳酸溶液或(huo)3%的來蘇爾傾覆在(zai)被(bei)污染(ran)(ran)處至少30分鐘,再(zai)做處理。工作衣帽等受到菌(jun)(jun)液污染(ran)(ran)時,應立(li)即脫(tuo)去,高壓蒸汽滅菌(jun)(jun)后洗滌。
15. 凡(fan)帶有活菌的物品,必須經(jing)消(xiao)毒后(hou),才(cai)能在水龍頭(tou)下(xia)沖洗,嚴禁污(wu)染下(xia)水道。
16. 無(wu)(wu)菌(jun)(jun)(jun)室應每月檢查菌(jun)(jun)(jun)落數(shu)。在超(chao)(chao)凈(jing)工作臺開啟的(de)狀(zhuang)態下(xia),取(qu)內徑(jing)90mm的(de)無(wu)(wu)菌(jun)(jun)(jun)培(pei)養(yang)皿(min)若干,無(wu)(wu)菌(jun)(jun)(jun)操作分(fen)別注(zhu)入融化并冷卻至(zhi)約(yue)45℃的(de)營養(yang)瓊脂培(pei)養(yang)基約(yue)15ml,放至(zhi)凝固后(hou),倒(dao)置(zhi)于30~35℃培(pei)養(yang)箱培(pei)養(yang)48小(xiao)時(shi),證明無(wu)(wu)菌(jun)(jun)(jun)后(hou),取(qu)平(ping)板3~5個,分(fen)別放置(zhi)工作位置(zhi)的(de)左中(zhong)右等處,開蓋暴露(lu)30分(fen)鐘后(hou),倒(dao)置(zhi)于30~35℃培(pei)養(yang)箱培(pei)養(yang)48小(xiao)時(shi),取(qu)出檢查。100級(ji)潔(jie)凈(jing)區平(ping)板雜菌(jun)(jun)(jun)數(shu)平(ping)均不得超(chao)(chao)過1個菌(jun)(jun)(jun)落,10000級(ji)潔(jie)凈(jing)室平(ping)均不得超(chao)(chao)過3個菌(jun)(jun)(jun)落。如超(chao)(chao)過限(xian)度,應對無(wu)(wu)菌(jun)(jun)(jun)室進行徹底消毒,直至(zhi)重(zhong)復(fu)檢查合乎(hu)要求(qiu)為止。