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技術文章

 無菌室的建造規程

2021-02-10 11:03:19

  1. 無(wu)菌室應(ying)設有無(wu)菌操(cao)作間(jian)(jian)和緩沖間(jian)(jian),無(wu)菌操(cao)作間(jian)(jian)潔凈度(du)(du)應(ying)達到(dao)(dao)10000級,室內溫(wen)度(du)(du)保(bao)持在20-24℃,濕度(du)(du)保(bao)持在45-60%。超(chao)凈臺潔凈度(du)(du)應(ying)達到(dao)(dao)100級。

  2. 無菌(jun)室(shi)應(ying)保持清潔,嚴禁(jin)堆放雜物,以防污(wu)染。

  3. 嚴(yan)防一切滅菌器材和培養基污染,已(yi)污染者應(ying)停(ting)止使用。

  4. 無菌室(shi)應備有工作濃(nong)度的消毒(du)液(ye),如5%的甲酚溶液(ye),70%的酒精,0.1%的新潔爾滅溶液(ye),等(deng)等(deng)。

  5. 無菌(jun)室應定期用適(shi)宜的(de)消(xiao)毒液滅菌(jun)清潔(jie),以保證無菌(jun)室的(de)潔(jie)凈度(du)符合要(yao)求。

  6. 需要帶入無菌(jun)(jun)室使(shi)用的(de)(de)儀器(qi),器(qi)械,平皿等一切物品(pin),均(jun)應(ying)包扎(zha)嚴密,并(bing)應(ying)經過適宜的(de)(de)方法滅菌(jun)(jun)。

  7. 工作人員(yuan)進(jin)入(ru)無菌室前(qian),必(bi)須(xu)用肥皂或(huo)消(xiao)毒液洗手消(xiao)毒,然后在緩沖(chong)間更換專用工作服(fu),鞋,帽子,口罩和手套(tao)(或(huo)用70%的乙(yi)醇(chun)再(zai)次擦拭雙(shuang)手),方可(ke)進(jin)入(ru)無菌室進(jin)行操作。

  8. 無菌(jun)(jun)(jun)室使用(yong)前必須打(da)開(kai)無菌(jun)(jun)(jun)室的紫(zi)外(wai)燈(deng)輻照滅(mie)菌(jun)(jun)(jun)30分(fen)鐘以上,并且(qie)同時打(da)開(kai)超(chao)凈臺進行吹風(feng)。操作完(wan)畢,應及時清理無菌(jun)(jun)(jun)室,再(zai)用(yong)紫(zi)外(wai)燈(deng)輻照滅(mie)菌(jun)(jun)(jun)20分(fen)鐘。

  9. 供試品在檢查(cha)前(qian),應(ying)保持外包裝完整,不(bu)得(de)開啟(qi),以防污染。檢查(cha)前(qian),用70%的酒精(jing)棉(mian)球消毒(du)外表面。

  10. 每次操(cao)作過程中(zhong),均(jun)應做陰性(xing)對照,以檢查無菌操(cao)作的(de)可靠性(xing)。

  11. 吸取菌液(ye)時,必(bi)須用(yong)吸耳球吸取,切勿直接用(yong)口(kou)接觸吸管。

  12. 接種(zhong)針每次使用前(qian)后,必須(xu)通過火焰灼燒(shao)滅菌,待(dai)冷(leng)卻(que)后,方(fang)可接種(zhong)培養物(wu)。

  13. 帶有菌液的(de)吸管,試管,培養皿等器皿應浸泡在盛有5%來蘇爾溶液的(de)消(xiao)毒(du)桶內消(xiao)毒(du),24小時后取出沖洗(xi)。

  14. 如有菌(jun)液灑在桌上或地上,應立(li)(li)即用5%石碳酸溶液或3%的來蘇(su)爾傾覆在被污染(ran)處至少30分鐘,再做處理(li)。工作衣帽等受到菌(jun)液污染(ran)時,應立(li)(li)即脫去,高壓蒸汽滅菌(jun)后洗(xi)滌。

  15. 凡帶(dai)有活菌的物品,必須經消毒后(hou),才能在(zai)水龍頭下(xia)沖(chong)洗,嚴禁污染下(xia)水道。

  16. 無(wu)菌(jun)室(shi)應每月檢(jian)查菌(jun)落數(shu)。在超凈工作臺(tai)開啟的狀態下,取內(nei)徑90mm的無(wu)菌(jun)培(pei)(pei)養皿若干(gan),無(wu)菌(jun)操作分(fen)(fen)別(bie)(bie)注入融化(hua)并冷(leng)卻至約45℃的營(ying)養瓊脂(zhi)培(pei)(pei)養基約15ml,放(fang)至凝固后(hou),倒置(zhi)(zhi)于(yu)30~35℃培(pei)(pei)養箱培(pei)(pei)養48小時(shi),證明無(wu)菌(jun)后(hou),取平(ping)板3~5個(ge),分(fen)(fen)別(bie)(bie)放(fang)置(zhi)(zhi)工作位置(zhi)(zhi)的左中右等處,開蓋暴(bao)露30分(fen)(fen)鐘后(hou),倒置(zhi)(zhi)于(yu)30~35℃培(pei)(pei)養箱培(pei)(pei)養48小時(shi),取出(chu)檢(jian)查。100級(ji)潔凈區平(ping)板雜菌(jun)數(shu)平(ping)均不得超過1個(ge)菌(jun)落,10000級(ji)潔凈室(shi)平(ping)均不得超過3個(ge)菌(jun)落。如(ru)超過限度,應對(dui)無(wu)菌(jun)室(shi)進行徹底(di)消毒,直至重復檢(jian)查合乎要求(qiu)為止(zhi)。